Efecto del plasma seminal sobre el estado redox del semen equino criopreservado / Effect of seminal plasma on the redox state of cryopreserved stallion semen

Objetivo. Determinar el efecto del plasma seminal sobre la generación de especies reactivas de oxígeno (ERO) y la peroxidación lipídica de semen equino criopreservado y su asociación con parámetros de calidad seminal. Materiales y métodos. El semen de cinco caballos de la raza criollo colombiano (dos eyaculados cada uno), fue criopreservado mediante un protocolo de congelación rápida, empleando un diluyente leche-yema de huevo, suplementado con 0%, 10% y 20% de plasma seminal equino. En muestras de semen fresco y criopreservado se evaluó la generación de ERO y la peroxidación lipídica por espectrofluorimetría, y los parámetros de calidad seminal de movilidad progresiva, vitalidad e integridad de membrana, mediante microscopia de contraste de fase. Para el análisis estadístico se ajustaron modelos mixtos y se realizaron análisis de regresión y correlación. Resultados. Se hallaron promedios post-descongelación de movilidad progresiva, vitalidad e integridad de membrana de 37.8%±20.2, 50.6% ± 14.6 y 37.8% ± 15.5, respectivamente. Para el semen fresco y criopreservado suplementado con 0%, 10% y 20% de plasma seminal, los promedios de producción de ERO (URF) fueron de 13.34±10.7, 16.15 ± 13.5, 17.32 ± 16 y 22.98 ± 19.4, respectivamente; mostrando un incremento estadísticamente significativo (p≤0.05) en la producción de ERO por efecto de la criopreservación y la suplementación con plasma seminal. Los promedios de peroxidación lipídica (nmolMDA/ml) para estos mismos tratamientos, fueron de 0.41 ± 0.25, 0.72±0.37, 0.51 ± 0.29 y 0.47±0.26, respectivamente; mostrando una reducción significativa (p≤0.05) de la peroxidación lipídica del semen suplementado con 10% y 20% de plasma seminal, respecto al semen no suplementado (0%). Conclusiones. El plasma seminal reduce la peroxidación lipídica del semen equino criopreservado.

Objective. Determine the effect of seminal plasma on the generation of reactive oxygen species (ROS) and lipid peroxidation of cryopreserved stallion semen, and its association with semen quality parameters. Materials and methods. The semen of five stallions of Colombian creole breed (two ejaculates each) was cryopreserved by a rapid freezing protocol, using a milk-egg yolk extender supplemented with 0%, 10% and 20% of equine seminal plasma. The samples of fresh and cryopreserved semen were evaluated for ROS generation and lipid peroxidation by spectrofluorimetry, and semen quality parameters of progressive motility, vitality and membrane integrity using phase contrast microscopy. Mixed models were adjusted for statistical, regression, and correlation analysis. Results. Post-thaw averages of progressive motility, vitality and integrity of membrane of 37.8% ± 20.2, 50.6% ± 14.6 and 37.8 ± 15.5%, respectively were found. For fresh and cryopreserved semen supplemented with 0%, 10% and 20% of seminal plasma, the averages of ROS production (RFU) were 13.34 ± 10.7, 16.15 ± 13.5, 17.32 ± 16 and 22.98 ± 19.4, respectively; showing a statistically significant increase (p≤0.05) of ROS production by effect of cryopreservation and seminal plasma supplementation. The averages of lipid peroxidation (nmolMDA / ml) for these same treatments were 0.41 ± 0.25, 0.72 ± 0.37, 0.51 ± 0.29 and 0.47 ± 0.26, respectively; showing a significant decrease (p≤0.05) of lipid peroxidation of semen supplemented with 10% and 20% of seminal plasma compared to unsupplemented semen (0%). Conclusions. Seminal plasma reduces lipid peroxidation of stallion cryopreserved semen.

Efecto de la maduración in vitro de oocitos bovinos con suero fetal bovino sobre su actividad mitocondrial post-desvitrificación / The effect of in vitro maturation of bovine oocites with fetal bovine serum on their mitochondrial activity following devitrification

Objetivo. Evaluar el efecto de la maduración in vitro (MIV) con suero fetal bovino (SFB) sobre la actividad mitocondrial (potencial de membrana) de oocitos bovinos desvitrificados. Materiales y métodos. Se recolectaron oocitos bovinos a partir de ovarios post-mortem, para su posterior MIV en medio Sintetic Oviductal Fluid Amino Acids (SOFaa) en tratamientos con y sin SFB. Posteriormente, fueron destinados para su criopreservación mediante vitrificación en Open Pulled Straw (OPS). Los oocitos fueron desvitrificados y evaluados para su potencial de membrana mitocondrial mediante el uso del colorante fluorescente JC-1. Los datos fueron analizados mediante la prueba t de Student y un análisis de varianza. Resultados. Los resultados evidenciaron una diferencia estadística (p<0.05) entre los tratamientos de MIV para los niveles cuantificados de potencial de membrana mitocondrial de los oocitos desvitrificados, con promedios de 39.8 ± 2.38% y 50.3 ± 2.59% para MIV con y sin suero respectivamente. No se encontró un efecto del suero en la MIV, sobre la distribución de mitocondrias de alto potencial de membrana, sin embargo, se observó diferencia estadística (p<0.05) para este parámetro entre los oocitos frescos y desvitrificados. Conclusiones. La presencia de SFB en la MIV de oocitos bovinos, ejerció un efecto deletéreo sobre el potencial de membrana mitocondrial posterior a la criopreservación, y esta última modifica las proporciones de los patrones de distribución de mitocondrias de alto potencial de membrana de los oocitos bovinos madurados in vitro.